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一起來了解一下免疫細胞無血清培養基的使用方法吧

更新時間:2020-04-15瀏覽:1855次

  免疫細胞無血清培養基可用于臍帶血或外周血中分離到的單核細胞向CIK細胞(細胞因子誘導的殺傷細胞)的體外誘導及體外大規模擴增培養。
 
  免疫細胞無血清培養基使用方法
 
  1、采集與分離外周血采集外周血,Ficoll密度梯度離心分離收集單個核細胞。
 
  2、單個核細胞的接種與誘導活化
 
  1) 0d時,繃胞計數。按細胞密度2x106cell/mL接種至對應體積的培養液中。添加誘導因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。
 
  2) 1d時(24小時),添加誘導因子YC002、YC003、YC004至已經接種細胞的培養液中。將YC005添加至未經使用的培養基中,待用。
 
  3、細胞的連續培養與擴增
 
  1) 3d時,補入新鮮培養液,調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時添加新加入培養液體積l10%比例的自體血漿。補液比例大致在1:2左右(原有培養液體積:新加培養液體積)
 
  2) 5d時,補入新鮮培養液,調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補液比例大致在1:3左右。
 
  3) 7d時,補入新鮮培養液,調整細胞密度至(06-08)x106cell/mL。補液比例大致在1:2左右。
 
  4) 9d時,將剩余培養液全部加入。
 
  主要特點
 
  1、無血清、不含異源動物成分;所有成分都是明確的,且同種來源(人),包括蛋白質;不含抗生素;
 
  2、能夠培養人淋巴細胞、CIK、DC、NK等各類免疫細胞;
 
  3、具有很高的成活率和擴增倍數;
 
  4、能夠維持高密度培養;
 
  5、具有很高的殺傷活性。
 
  注意事項
 
  1、如果觀察培養基種有可見的沉淀物,不能再使用;
 
  2、超過標簽上的截止使用日期,不得再使用;
 
  3、所有組分均應避光保存;
 
  5、本產品請于陰涼干燥處避光保存,保存條件:2-8℃,避免反復凍融。拆封后請于2周內用完。